【摘 要】
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试验旨在探索lncRNA NONSUST004358.1在猪前体脂肪细胞分化过程中的表达规律以及在脂肪细胞分化过程中的作用。分离培养5日龄从江香猪原代前体脂肪细胞，检测AMP活化蛋白激酶a1（PRKAA1）和lncRNA NONSUST004358.1在诱导分化过程中的表达规律，构建pEGFP-C1-lncRNA NONSUST004358.1重组真核表达载体，转染猪前体脂肪细胞，检测脂肪沉积相关
【基金项目】
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内质网应激-自噬途径在PEDV感染致病中的机制研究（贵大人基合字（2020）63号）； 基于脂质组学技术探究PEDV感染诱导的细胞内质网应激调控脂质代谢及病毒复制的分子机制（贵大培育[2020] 85号）；
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试验旨在探索lncRNA NONSUST004358.1在猪前体脂肪细胞分化过程中的表达规律以及在脂肪细胞分化过程中的作用。分离培养5日龄从江香猪原代前体脂肪细胞，检测AMP活化蛋白激酶a1（PRKAA1）和lncRNA NONSUST004358.1在诱导分化过程中的表达规律，构建pEGFP-C1-lncRNA NONSUST004358.1重组真核表达载体，转染猪前体脂肪细胞，检测脂肪沉积相关基因PRKAA1、脂肪酸合成酶（FAS）、激素敏感脂酶（HSL）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的相对表达量和蛋白表达量，同时测定甘油三酯和胆固醇含量。结果显示：PRKAA1与lncRNA NONSUST004358.1在肌内和皮下前体脂肪细胞诱导分化过程中呈先上升后下降的表达模式，均在48～96 h表达量较高。过表达lncRNA NONSUST004358.1后，肌内前体脂肪细胞中PRKAA1和FAS的相对表达量与蛋白表达量高于对照组（P＜0.01）,PPARγ相对表达量高于对照组（P＜0.01）,HSL蛋白表达量低于对照组（P＜0.01）；皮下前体脂肪细胞中PPARγ相对表达量（P＜0.05）与蛋白表达量（P＜0.01）高于对照组，FAS相对表达量与蛋白表达量低于对照组（P＜0.01）。肌内前体脂肪细胞中，过表达lncRNA NONSUST004358.1后胆固醇含量高于对照组（P＜0.01），皮下前体脂肪细胞中胆固醇含量高于对照组（P＜0.05）；皮下和肌内前体脂肪细胞中甘油三酯含量均高于对照组（P＜0.05）。综上可知，lncRNANONSUST004358.1能调控脂肪沉积相关基因PRKAA1、FAS、HSL、PPARγ的表达，影响脂肪细胞中油三酯和胆固醇含量，为后续探究lncRNA NONSUST004358.1在脂肪细胞分化中的作用理提供了理论支撑。
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