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以BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切已构建的pGEM-T-85A和pET28a(+),并将纯化的Ag85A基因亚克隆至pET28a(+)中,构建出原核表达质粒pET28a-85A.将pET28a-85A转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约32 ku的外源蛋白带.Western-blotting分析表明,该蛋白具有牛分枝杆菌的抗原性.