【摘 要】
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目的构建酵母双杂合系统诱饵蛋白表达质粒pGBT9-hERR1/HBD.方法 PCR扩增hERR1/HBD(激素激活域)cDNA,与酵母Gal4/DBD(DNA结合域)表达质粒pGBT9重组构建融合蛋白表达质粒,酶切
【机 构】
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第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室
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目的构建酵母双杂合系统诱饵蛋白表达质粒pGBT9-hERR1/HBD.方法 PCR扩增hERR1/HBD(激素激活域)cDNA,与酵母Gal4/DBD(DNA结合域)表达质粒pGBT9重组构建融合蛋白表达质粒,酶切、测序鉴定后,用于酵母双杂合分析,检查其自主转录激活作用及与已知hERR1辅活化子PNRC的相互作用.结果该质粒有正确的阅读框,其表达蛋白不具有自主转录激活作用,与已知核受体辅活化子PNRC有明显的相互作用.结论成功构建了表达质粒pGBT9-hERR1/HBD,并证实该质粒可作为酵母双杂合系统的
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