棉花U3和U6启动子在CRISPR/Cas9基因组编辑体系中的功能鉴定

来源 :棉花学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Anody12341234

【摘要】

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【目的】对已克隆的海岛棉U3和U6启动子进行功能鉴定,为构建棉花CRISPR/Cas9多位点基因编辑技术体系提供更多可用的U3和U6启动子。【方法】分别构建以GbU3-2P和GbU6-7P为启动

【作者】

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藏旭阳代培红李继洋蒲艳顾爱星刘晓东

【机构】

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新疆农业大学农学院/新疆农业大学农业生物技术重点实验室

【出处】

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棉花学报

【发表日期】

：

2019年1期

【关键词】

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棉花 CRISPR/Cas9 基因组编辑 U3/U6启动子原生质体

【基金项目】

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国家自然科学基金“GhGGB调控棉花抗旱功能及其分子作用机制的研究”

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【目的】对已克隆的海岛棉U3和U6启动子进行功能鉴定,为构建棉花CRISPR/Cas9多位点基因编辑技术体系提供更多可用的U3和U6启动子。【方法】分别构建以GbU3-2P和GbU6-7P为启动子驱动sgRNA,以抗旱负调控基因GGB为靶序列的CRISPR/Cas9基因编辑载体,然后在新海16的棉花叶片原生质体中进行功能鉴定。通过Polymerasechainreaction方法富集构建好的CRISPR/Cas9基因编辑载体的核心片段,并利用PEG瞬时转化法将核心片段转入原生质体中。提取转化后的原生质体基

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