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目的：制备用于nm23-HI基因raRNA实时荧光定量PCR检测的质粒标准品。方法：通过PCR扩增出目的片断，纯化后T-A连接至pMD18-T载体，转化宿主菌E.coliDH5α，获得阳性克隆；通过PCR扩增、双酶切鉴定和测序分析，确认重组质粒完整正确；大量抽提重组质粒，测定其拷贝浓度，10倍稀释成梯度标准品，并进行荧光定量PCR检测分析。结果：nm23～H1基因目的片段成功重组至pMD18-T载体上，获得的重组质粒保持了目的片段的特异性和序列完整性。梯度浓度标准质粒的荧光定量PCR结果显示，循环阈值（C