【摘 要】
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目的制备抗人端粒重复序列结合因子片段(TRF133-277)单克隆抗体(单抗),探讨其生物学特性.方法以GST-TRF133-277融合蛋白为抗原,经细胞融合及ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞,对其进行染色体核型分析,将此单抗作为探针用于Western blot和免疫组化检测标本.结果获得1个抗TRF1蛋白的杂交瘤细胞株.以抗TRF133-277单抗作Western blot检测正常人及急性白
【机 构】
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310003,杭州,浙江大学医学院附属第一医院,
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目的制备抗人端粒重复序列结合因子片段(TRF133-277)单克隆抗体(单抗),探讨其生物学特性.方法以GST-TRF133-277融合蛋白为抗原,经细胞融合及ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞,对其进行染色体核型分析,将此单抗作为探针用于Western blot和免疫组化检测标本.结果获得1个抗TRF1蛋白的杂交瘤细胞株.以抗TRF133-277单抗作Western blot检测正常人及急性白血病患者骨髓、大肠癌组织及近旁正常粘膜组织提取蛋白,在相对分子质量60 000处有一特异性条带,与阳性对照纯化TRF1蛋白相一致,免疫组化显示该抗体在上皮细胞及骨髓造血细胞胞浆中阳性着色.结论制备了具有高度特异性的抗TRF133-277单抗;建立了Western blot和免疫组化检测组织表达TRF1蛋白的方法.
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