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为建立猪脑心肌炎病毒（EMCV）HB10株cDNA感染性克隆，本研究利用反向遗传操作技术，采用RT．PCR一次性扩增EMCV．HB10株全长基因组（包括5’和3＇UTR）序列，并直接克隆于低拷贝载体pOK12中，构建了EMCV感染性重组质粒pOK12．EMCV．HB10。将重组质粒体外转录后转染BHK-21细胞进行病毒拯救。结果显示，转染细胞36h后，出现典型的细胞病变。拯救病毒rEMCV．HB10全基因组经测序鉴定显示，与亲本病毒开放阅读框比较，其仅在1D基因出现两个核苷酸突变：即A37G（R13K）和