帕金森病(PD)的发病机制中涉及到遗传因素和环境因素双方面的作用。环境因素通过线粒体导致氧化应激和α-synuclein聚集,但其确切的作用机制尚不明确。本实验利用转染α-synuclein的SH—SY5Y细胞为模型,研究α-synuclein对鱼藤酮诱导氧化应激的影响从而进一步地了解α-synuclein、线粒体和氧化应激之间的关系。 方法：人神经母细胞瘤细胞株SH—SY5Y转染入α-synuclein—GFP,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况。RT—PCR检测α-synuclein基因的表达,免疫细胞化学测定α-synuclein蛋白的分布。实验分组为转染α-synuclein组、鱼藤酮处理的转染α—synuclein组和未转染组、对照组为SH—SY5Y细胞。各组细胞分别用不同浓度的鱼藤酮处理不同的时间后,MTT法测细胞的活力,DCF法检测细胞的氧化应激状态,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶的活力。 结果：RT—PCR显α-synuclein基因的存在。在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白和α-synuclein的表达。用不同浓度的鱼藤酮处理细胞,在不同的时间所有的细胞均表现为细胞活力下降、complex I的活性降低、DCF法检测表明细胞内存在氧化应激。机体的抗氧化系统测定结果显示在转染α-synuclein的细胞内其SOD的活力高于未转染的细胞(P<0.01)。经过鱼藤酮处理后所有的细胞均呈现SOD活力降低,特别是作用后的48小时SOD活力有些增高后又迅速下降。 结论：农药鱼藤酮可以使SH—SY5Y细胞产生氧化应激。转染入α—synuclein基因的细胞显示出对鱼藤酮的作用有一定的耐受性,表现为抗氧化系统功能增强。这种抗氧化作用的增强也可能是细胞对外界损害的一种代偿反应。