论文部分内容阅读
为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因SyBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法，本研究根据Genbank收录的TGEV-Miller毒株S蛋白基因序列，设计合成一对引物，用RT-PCR方法从疫苗株中扩增TGEV S基因，将纯化后的PCR产物与pGEM-T Easy载体连接并转化宿主细胞DH5α，得到阳性重组质粒pGEM-TS。以重组质粒为标准模板，建立SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR标准曲线，并进行灵敏度和特异性试验。结果显示建立的猪传染性胃肠炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法具有灵敏度高、检测快速、定量准确、特异性和重复性好等优点，可用于临床猪传染性胃肠炎病毒感染检测。