目的揭示葛根素影响甲氨蝶呤药动学的分子机制,为临床合理用药提供科学指导。方法采用大鼠in vivo口服和静注、in vitro翻转肠实验、肾切片摄取实验以及MDR1-MDCK细胞转运实验、OAT1/3-HEK293细胞摄取实验考察葛根素对甲氨蝶呤药代动力学的影响和分子机制,生物样品中葛根素和甲氨蝶呤的含量应用LC-MS/MS检测。结果合用葛根素后,甲氨蝶呤的口服生物利用度提高了58%,静注甲氨蝶呤时肾脏清除率显著下降(从1.91±0.09 mL/min下降为0.82±0.07mL/min)。葛根素可显著提高甲氨蝶呤的体外肠吸收,并抑制肾切片对甲氨蝶呤的摄取。同时,葛根素抑制MDR1-MDCK细胞外排地高辛转运的IC50为1.6μM,且可显著抑制甲氨蝶呤经MDR1-MDCK细胞的外排转运。此外,OAT1/3-HEK293细胞摄取葛根素与mock-HEK293没有差异,但葛根素可抑制OAT1/3-HEK293细胞对经典底物(PAH和PCG)和甲氨蝶呤的摄取。结论葛根素影响甲氨蝶呤药动学的分子靶点为肠道P-gp和肾脏OATs,葛根素是P-gp和OATs的抑制剂,提示葛根素与甲氨蝶呤或其他P-gp及OATs底物合用时,可能发生潜在的药物相互作用。