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造血干细胞来源一直是临床移植的主要挑战之一.胚胎干细胞诱导的造血干细胞具有进一步分化为血系细胞的潜能，但诱导分化效率低下.因此，提高胚胎干细胞向造血干细胞诱导分化效率，可解决造血干细胞在临床应用及基础研究过程中材料不足的难题.本研究取胚胎龄12.5-14.5天的小鼠胚胎，分离小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)，丝裂霉素C处理以制备小鼠饲养层细胞用于培养E14TG2a细胞.培养的胚胎干细胞碱性磷酸酶呈阳性，核型正常且高度表达全能性基因Oct4和Nanog；在甲基纤维素半固体培养基中添加细胞因子组合诱导E14TG2a向造血干细胞分化，进一步利用流式细胞仪分析发现诱导后Flk1+(中胚层细胞标志蛋白)细胞数量明显多于对照组，且在第五天达到最大值；CD34+/Sca-1+(造血干细胞标志蛋白)细胞数量也明显高于对照组并在诱导第十三天达到最大值.Real-time PCR进一步检测发现造血干细胞相关基因Flk1、Bmp4及CD34的表达量均高于对照组，而Smad5的表达则明显受到抑制.实验结果说明甲基纤维素培养法有助于提高E14TG2a细胞向小鼠造血干细胞的诱导分化效率，为造血干细胞基础研究和临床应用提供理论依据.