(目的)为猪肺炎支原体基因工程亚单位疫苗的研发提供候选抗原蛋白。(方法)通过生物信息学方法预测Mhp153、Mhp303、Mhp364、Mhp366、Mhp367蛋白的亚细胞定位。合成mhp153、mhp303、mhp364、mhp366、mhp367基因,在合成过程中将编码色氨酸的密码子TGA突变为TGG,合成的基因连接pGEX-6P-1载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态,IPTG诱导目的蛋白表达。利用谷胱甘肽磁珠和PsP酶纯化目的蛋白。(结果)生物信息学方法预测表明Mhp153、Mhp303、Mhp364、Mhp366、Mhp367蛋白位于细胞外膜,这些蛋白均能以具有良好天然构象的可溶形式在大肠杆菌BL21(DE3)中与GST蛋白融合表达,表达的融合蛋白分子量分别为80kμ、46 kμ、87 kμ、90 kμ和87kμ。其中,Mhp364、Mhp366、Mhp367蛋白能被PsP酶酶切。(结论)为猪肺炎支原体基因工程疫苗的研发提供了候选抗原蛋白和研究材料。