LPS对新生小鼠心肌细胞体外增殖能力的影响

来源 :中国环境诱变剂学会致突变、致畸学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qingyou123
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  目的 探讨脂多糖(LPS)诱导的炎症反应对新生C57小鼠心肌细胞体外增殖能力的影响.方法 (1)分离不同日龄(出生后1d、3d、5d、7d)新生C57小鼠的心肌细胞,分别进行体外原代培养,从数量、形态、搏动频率、生长曲线、存活率等方面来观察各组细胞在体外生长增殖的特征;用免疫组化和RT-PCR技术检测MHC、α-actin、Meis1、Nkx2.5、GATA-4等心肌细胞增殖相关因子的表达情况,探讨不同日龄心肌细胞增殖能力的差异.(2)用1μg/ml的LPS刺激不同日龄的心肌细胞,构建心肌细胞炎性受损的模型,采用Western blot方法测定NF-κBp65、TNF-α等凋亡相关因子以及NLRP3、IL-Iβ、Caspase-1等炎症相关因子的表达情况,初步探讨炎性条件下心肌细胞增殖能力的改变.结果 (1)出生3天以内的乳鼠心肌细胞具有较强的增殖能力,其细胞数量、体积、搏动频率和幅度均明显大于出生3天后乳鼠的心肌细胞,MHC、α-actin、Meis1等增殖相关因子的表达量也明显高于出生3天后的乳鼠的心肌细胞.(2)在1μg/ml LPS诱导炎症反应的条件下,不同日龄乳鼠的心肌细胞在数量、交联程度以及搏动频率方面与阴性对照组相比均有不同程度的减小,NF-κB、TNF-α、NLRP3和Caspase-1的表达水平较阴性对照组明显升高,但出生3天以内的乳鼠心肌细胞的存活率仍明显高于出生3天后的乳鼠.结论 不同日龄乳鼠的心肌细胞在体外培养条件下其生长增殖特征存在差异,出生3天以内的乳鼠的心肌细胞其增殖能力明显大于出生3天以后的乳鼠;在LPS诱导的炎性损伤的条件下,乳鼠心肌细胞的凋亡增加而增殖能力下降,但出生3天以内乳鼠心肌细胞的增殖能力仍明显高于出生3天后的乳鼠.
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