盐酸千金藤碱对牙髓干细胞增殖及成骨分化的影响

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目的:初步探究盐酸千金藤碱(Cepharanthine hydrochloride,CH)对人牙髓干细胞(DPSCs)增殖和成骨分化能力的影响。方法:收集健康成人无牙体牙周等疾病的阻生齿,体外组织块法分离培养DPSCs,有限稀释法纯化细胞,检测DPSCs生物学特性,配制0、2.5、5、10和20μM浓度CH的培养液和成骨诱导液,MTT法检测不同浓度CH对DPSCs增殖能力的影响,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测CH对DPSCs的ALP活性的影响,Western blotting检测蛋白水平骨钙素(Osteocalcin,OCN)和核心结合因子(Runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达。结果:分离培养的DPSCs具有间充质干细胞特征;MTT法检测到CH在2.5-5μM浓度范围内促进牙髓干细胞增殖,10μM CH对牙髓干细胞增殖无统计学意义,20μM CH对牙髓干细胞有显著的细胞毒性作用;机制的研究显示低浓度CH可提高ALP活性,并上调OCN和Runx2的蛋白表达。结论:本研究成功分离培养有间充质干细胞特性的DPSCs,CH可以在一定浓度范围促进DPSCs增殖和成骨分化。
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