【摘 要】
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H5N1亚型高致病性禽流感给我国以及东南亚地区的养禽业造成了巨大的经济损失,疫苗免疫接种是控制本病流行的最有效手段.本研究采用RT-PCR技术分别扩增了鹅源高产禽流感病毒的6条内部基因片断,近期分离的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因以及N3亚型参考毒株的神经氨酸酶基因,分别构建了8个基因的转录与表达载体,利用反向遗传学技术拯救出了全部基因,且都来自于禽源的重组流感病毒疫苗株rH5N3.通过对血凝
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001 中国农业科学院哈
【出 处】
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中国畜牧兽医学会生物制品学分会第十次学术研讨会
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H5N1亚型高致病性禽流感给我国以及东南亚地区的养禽业造成了巨大的经济损失,疫苗免疫接种是控制本病流行的最有效手段.本研究采用RT-PCR技术分别扩增了鹅源高产禽流感病毒的6条内部基因片断,近期分离的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因以及N3亚型参考毒株的神经氨酸酶基因,分别构建了8个基因的转录与表达载体,利用反向遗传学技术拯救出了全部基因,且都来自于禽源的重组流感病毒疫苗株rH5N3.通过对血凝素基因连接肽处的4个碱性氨基酸(R-R-K-K)基因缺失,消除了HA基因的毒力相关序列,拯救出的rH5N3病毒对鸡和鸡胚均无致病性,鸡胚尿囊液的HA效价1∶2048,比亲本病毒产量提高8倍.疫苗免疫鸡后2周即可检出HI抗体,免疫后4周左右HI抗体水平最高,鸡免疫后18周应然保持高水平的HI抗体.以rH5N3制备的油乳剂灭活苗免疫不论是对于国内早期分离的禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96还是近期分离的A/Goose/HLJ/QFY/04都能够产生良好的免疫保护作用,免疫鸡攻毒后不排毒、不发病、不死亡.
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本文将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性.将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,同时,将重组菌分别与pVAX1-IFN-γ或pVAX1-IL2(200μg/只)联合免疫,通过测定小肠黏膜抗体效价,
当前,我国养殖业(畜牧养殖/水产养殖等)已时入一个快速增长的时期,2004年,全国畜牧养殖生产心管受到了禽流感的影响,仍然实实现了新的突破,全年全国肉类总产量增幅达4﹪以上,奶类产量断续保持两位数增长,禽蛋产量与去年基本持平或略有增长;同样我国水产养殖总量已占到了全球总量的73﹪,成为世界绝对的水产养殖第一大国.尽管我国畜牧养殖总量大,但平均规模小,全国生猪、肉牛的规模饲养率只有30﹪,西部个别牧
鸽圆环病毒(pigeoncircovrius,PiCV)是圆环病毒科的一个成员,是一种免疫抑制性病原.圆环病毒感染的鸽主要表现为昏睡、嗜眠、厌食、体重减轻,呼吸性窘迫等症状.用PCR法从浙江杭州某鸽养殖场检测并克隆到2株鸽圆环病毒全基因组序列.经测序表明,浙江PiCV-zj1及PiCV-zj2基因组序列全长均为2039bp.DNAStar软件分析表明,浙江株鸽圆环病毒与已发表的鸽圆环病毒序列同源性
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该试验利用本室保存的山羊痘强毒组织毒,经羊体复壮繁殖后,采集发痘组织,加入保护剂,选择适当的冻干曲线进行冻干.冻干品外观良好,经2-4齿龄健康山羊体测定毒价,其ID50=10-5.5/0.2ml.试验取得了较满意的结果.
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