【摘 要】
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采用差速和蔗糖密度梯度离心法,分离纯化栉孔扇贝(Chlamysfarreri)急性病毒性坏死症病毒(AcuteVirusNecrobioticVirus,AVNV).用Trizol试剂抽提病毒RNA,采用随机引物和Oligo(d
【机 构】
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中国水产科学研究院,黄海水产研究所,山东,青岛,266071
【出 处】
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国家“863”计划资源环境技术领域第三届海洋生物高技术论坛
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采用差速和蔗糖密度梯度离心法,分离纯化栉孔扇贝(Chlamysfarreri)急性病毒性坏死症病毒(AcuteVirusNecrobioticVirus,AVNV).用Trizol试剂抽提病毒RNA,采用随机引物和Oligo(dT)双引物法,SuperScriptⅡ反转录酶合成cDNA,并克隆于pUC118质粒上,利用蓝白斑筛选阳性克隆子,PCR法快速鉴定重组质粒.经筛选得到2个阳性克隆23＃、52＃,插入片段大小约为1200bp和800bp.测序结果与GenBank数据库的比对分析显示,尚未有类似的序列报道,提示该病毒可能为一种新发现的病毒.
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