FISH技术联合骨髓染色体检查诊断白血病的临床价值分析

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目的:白血病是一类造血干细胞异常的克隆性恶性疾病,克隆的白血病细胞失去进一步分化成熟的能力而停滞在细胞发育的不同阶段。白血病约占肿瘤总发病率的3%,是儿童和青少年中最常见的一种恶性肿瘤。白血病的实验室诊断依赖于形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学等多种手段来共同完成。荧光原位杂交(FISH)技术近年来发展迅速,具有不受中期分裂像质量、可准确分析间期细胞、敏感可靠与定位的特点,对疾病诊断具有重要作用,但在我国白血病的临床诊断中还应用不够广泛。本文综合分析了白血病临床实验室诊断中同时采用FISH技术及染色体分析检测白血病细胞遗传学异常的价值,为白血病的实验室准确诊断提供依据。方法:2009年至2011年抽取来我院初诊白血病患者肝素钠抗凝骨髓标本1-2ml,无菌提取单个核细胞培养48天,收获、滴片与雷氏染色,对培养后骨髓细胞进行G显带法染色体分析。同时,培养后的标本收获、滴片后用相应的探针杂交后,进行FISH技术检测。结果:在所调查的30例白血病患者骨髓标本中,经染色体培养形态学检出率为60%,其中9例t(9;22),3例克隆性t(15;17),3例t(8;21),2例11号染色体异常,1例亚三倍体;而FISH检测异常率为83.3%,其中t(9;22)13例,t(1 5;17)4例,t(8;21)3例,8号染色体三倍体3例,11号染色体重排2例。骨髓染色体培养形态学和FISH两项检测的符合率为76.7%,以显著的染色体培养形态学最为明显;FISH检测为异常但骨髓染色体培养检查为正常的7例,占23.3%。无骨髓染色体培养检查为异常但FISH检测为正常的样本。结论在白血病的临床细胞遗传学检测中,染色体分析和FISH检测结果多数较吻合。但是由于两种方法的检测原理和检测水平的不同,其结果还有一定差异。骨髓染色体分析主要检测克隆形成,并分析大片段染色体的缺失与突变,也适宜发现未知的异常,且常规骨髓染色体G显带为FISH分析提供可靠线索;而FISH技术可准确分析间期细胞,计数数百个细胞阳性率,利用已知探针检测靶基因的微小缺失,对已知微小缺失更敏感与可靠,但对不确定的异常难以检出。因此,联合应用FISH技术与骨髓染色体检查,两种方法互为补充,用于白血病的细胞遗传学与分子诊断,可提高异常检出率,使结果更加准确与可靠,为其临床诊断和疗效判定提供实验室基础。
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