论文部分内容阅读
流行性腹泻病毒(PEDV)感染导致猪肠绒毛损伤、吸收功能紊乱,出现严重腹泻甚至死亡。由于肠道受损严重,感染PEDV的猪生长性能显著降低,极大地影响养猪生产效率。有研究表明N-乙酰半胱氨酸(NAC)具有抗氧化、抑制炎性反应、调节免疫反应、抗细胞凋亡等作用。本试验通过体外研究NAC调控细胞生长与生理功能、工型干扰素信号通路基因探究NAC对PEDV抑制的作用机理。将试验处理按2×2设计分4个组:空白对照组、病毒处理组、NAC处理组、NAC+病毒处理组,每个处理4个重复。培养72h后提取RNA,反转成cDNA,用实时荧光定量PCR方法检测IPEC-1生长与生理功能相关基因、Ⅰ型干扰素信号通路基因、病毒相关基因水平。结果显示:1)单独添加1 mmol/L NAC可提高IPEC-1细胞的EPOR、AMY2、ASCT1、EFEMP1、AQP3、IGFBP3、SMAD7及GHR水平(P<0.01)。PEDV感染IPEC-1后,1 mmol/L NAC同样提高了AMY2、ASCT1、IGFBP3、TGFB1 mRNA水平(P<0.05)。2)1 mmol/L NAC提高了I型干扰素信号通路关键分子如IFN-α、IFN-β、IRF9、IFNAR2、STAT1、IRF9、Mxl的mRNA水平(P<0.05)。PEDV感染IPEC-1后,1 mmol/L NAC提高了IFN-β和IRF9的mRNA水平(P<0.05)。3)1 mmol/L NAC提高了PMAIP1、RGS2 mRNA水平(P<0.05)。而PEDV感染IPEC-1后,1 mmol/L NAC也可提高RGS2 mRNA水平(P<0.05)。由此可见,NAC可调控PEDV感染IPEC-1细胞的生长、增殖、炎症反应等相关基因的表达,并通过激活工型干扰素信号通路抑制PEDV对IPEC-1细胞的感染。