【摘 要】
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目的：初步探讨EGCG处理A549细胞对乏氧条件下IKKβ/NF-κB信号通路及顺铂化疗疗效的影响.方法：不同浓度EGCG加入A549细胞2h后于200uMCoCl2化学模拟缺氧环境中培养24h,westemblot检测人肺腺癌A549细胞中NF-κBp65、Iκκβ/磷酸化-Iκκβ的表达,细胞免疫荧光技术检测NF-κBp65蛋白的核移位,Heochst33258单染法观察EGCG对乏氧状态下A
【机 构】
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中南大学湘雅医院呼吸科 410003长沙
【出 处】
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中国抗癌学会肺癌专业委员会第十二届全国肺癌学术大会
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目的：初步探讨EGCG处理A549细胞对乏氧条件下IKKβ/NF-κB信号通路及顺铂化疗疗效的影响.
方法：不同浓度EGCG加入A549细胞2h后于200uMCoCl2化学模拟缺氧环境中培养24h,westemblot检测人肺腺癌A549细胞中NF-κBp65、Iκκβ/磷酸化-Iκκβ的表达,细胞免疫荧光技术检测NF-κBp65蛋白的核移位,Heochst33258单染法观察EGCG对乏氧状态下A549细胞核的形态,Annexin V-FTTC/PI双染法结合流式细胞仪测定EGCG单独或联合顺铂对乏氧条件下A549细胞的凋亡率及应用MTT法检测不同浓度顺铂作用时A549细胞存活率、IC50.
结果：westernblot检测显示EGCG预处理A549细胞2h再于乏氧环境下培养24h后,A549细胞核中的NF-κBp65蛋白及细胞中磷酸化-Iκκβ蛋白的表达较单纯乏氧组A549细胞呈EGCG浓度依赖性减少(p＜0.01).163.6uM EGCG预处理A549细胞2h后,乏氧环境中A549细胞出现典型的凋亡改变,A549细胞的凋亡率由0.603±0.106％上升至2.307±0.523％(p=0.00),与10uM顺铂联合时,A549细胞的凋亡率由8.885±1.773％上升至17.829±3.334％(p＜0.05),当不同浓度顺铂作用时,乏氧状态下A549细胞的存活率均下降(p＜0.05),IC50由107.01±10.65uM下降至28.28±3.85uM(p=0.001).
结论：EGCG预处理A549细胞可能通过抑制乏氧条件下Iκκβ磷酸化,阻止NF-κBp65入核并逆转A549细胞顺铂耐药.
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