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研究背景:结核病(Tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的高致死性传染病。c GAS是新发现的胞内DNA受体,识别病毒DNA后激活下游STING-TBK1通路,介导抗病毒应答。已有研究发现TBK1通过激活自噬接头蛋白p62,促进细胞自噬。细胞自噬是新发现的促进巨噬细胞(macrophages,Mφ)有效清除MTB的抗菌途径。那么,c GAS是否通过TBK1调控细胞自噬,进而参与Mφ抗结核免疫应答?研究目的 :探究胞内DNA受体c GAS是否影响Mφ抗结核免疫应答。方法 :用MTB DNA或c GAMP刺激激活c GAS受体通路。在Mφ中沉默c GAS,再给予MTB感染或者MTB DNA/c GAMP刺激,通过菌落形成实验(cloning forming unit,CFU)检测胞内菌的存活;用Western blot及免疫荧光检测细胞自噬的发生;通过激光共聚焦检测MTB与自噬体或溶酶体的共定位。用TBK1特异性抑制剂BX795或si RNA抑制TBK1,检测c GAS受体通路对胞内菌量及细胞自噬的影响。结果 :沉默Mφ中c GAS后,MTB DNA诱导的细胞因子水平明显下调。并且c GAS被沉默后,Mφ胞内MTB存活增加;而用c GAMP刺激激活c GAS受体通路,胞内MTB存活减少。进一步实验发现,MTB感染Mφ时,用c GAMP或MTB DNA激活c GAS受体通路,细胞自噬水平上调,LC3 II型蛋白水平明显上调,LC3斑点聚集增加。然而,当沉默c GAS后,细胞自噬水平显著下降,并且MTB吞噬体与自噬体或溶酶体的融合减少。当沉默或抑制TBK1后,再给予MTB感染或c GAMP刺激,细胞自噬水平明显下调;并且抑制TBK1后,胞内MTB存活增加。结论 :c GAS识别MTB DNA,诱导细胞自噬,从而促进Mφ清除胞内MTB。