【摘 要】
:
本实验旨在利用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术对蒙古绵羊雌性生殖道sBD-1-mRNA表达水平进行相对定量测定,建立蒙古绵羊β-防御素基因(sBD-1-mRNA)相对表达水平的实时荧光定量PCR方法。根据GenBank中羊β-防御素基因序列,设计合成引物,对sBD-1-mRNA进行实时荧光定量PCR检测。以β-Actin为内参基因,对sBD-1-mRNA进行均一化处理,利用荧光阈值(
【机 构】
:
吉林大学 畜牧兽医学院,吉林省 长春 130062;内蒙古农业大学 动物科学与医学学院,内蒙古 呼和浩特 010018
【出 处】
:
中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十五次学术研讨会
论文部分内容阅读
本实验旨在利用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术对蒙古绵羊雌性生殖道sBD-1-mRNA表达水平进行相对定量测定,建立蒙古绵羊β-防御素基因(sBD-1-mRNA)相对表达水平的实时荧光定量PCR方法。根据GenBank中羊β-防御素基因序列,设计合成引物,对sBD-1-mRNA进行实时荧光定量PCR检测。以β-Actin为内参基因,对sBD-1-mRNA进行均一化处理,利用荧光阈值(Ct 值)计算sBD-1-mRNA的相对表达量。经测序分析,扩增产物为β-防御素。SYBRGreen Ⅰ实时荧光定量PCR技术可以测定蒙古绵羊β-防御素 mRNA表达水平相对含量。
其他文献
本试验运用免疫组织化学方法,探讨了Ghrelin免疫反应阳性神经元在岭南黄鸡脑的定位分布。结果表明,在下丘脑弓状核、室旁核、内侧核、室周区、内侧区、外侧区,丘脑卵圆核、圆核,小脑内侧核,中脑红核,脑桥前庭腹外侧核等神经核团均可观察到Ghrelin免疫反应阳性神经元;大脑皮质多形细胞层、小脑皮质颗粒层、中脑丘中央灰质层亦可见Ghrelin免疫阳性反应。本试验为进一步研究鸡Ghrelin的生理功能及其
Ghrelin是生长激素促泌素受体的内源性配体,具有调节GH释放、调节摄食行为、调节能量平衡等功能。本试验运用免疫组织化学等方法,探讨了岭南黄羽肉鸡自由采食30d后分别禁食12h、24h、48h及其重新采食4h对下丘脑Ghrelin阳性神经元的影响。结果表明,在禁食条件下,下丘脑Ghrelin阳性神经元的免疫反应和细胞密度均下降,抑制Ghrelin的分泌。
利用免疫组织化学超敏SP法检测SD大鼠摘除卵巢后用17β-雌二醇和中药菟丝子提取物治疗后小脑中Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果:摘除双侧卵巢后,小脑皮质及深层核团中Bcl-2表达不同程度降低,而Bax的表达出现不同程度的上升;给予外源性雌激素及菟丝子提取物治疗后,两种蛋白的表达基本恢复正常,而且雌激素治疗组和菟丝子提取物治疗组问差异不显著。表明雌激素和中药菟丝子提取物都能够不同程度的下调小脑
为了获得纯度较高的星形胶质细胞,为进一步研究星形胶质细胞奠定基础。本研究采用原代、震荡和传代培养的方法,结合免疫组织化学SP法,进行了星形胶质细胞体外培养与鉴定。结果表明:采用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基进行星形胶质细胞原代培养,在37℃,260r/min恒温摇床震荡18h,进行2次传代后,细胞排列均匀,细胞突起明显,主要呈梭形、多角形等;星形胶质细胞的纯化率达到99%以上,完全可以满
目的:研究S100蛋白在大鼠动情周期子宫内的分布情况及变化规律。[方法]采用阴道涂片方法将16只雌性SD大鼠分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期4组,处死各组大鼠取子宫制作石蜡切片,采用免疫组织化学超敏感SP(Streptavidin-Peroxidase,SP)法研究S100蛋白在大鼠动情周期子宫内分布的变化规律。[结果]子宫各层均有不同程度S100蛋白免疫阳性产物的分布,主要定位于子宫内膜
研究5-HT在大鼠动情周期子宫中的分布情况和变化规律。选择健康、未产、体重220g~250g左右的成年雌性SD大鼠24只,阴道涂片鉴定分为动情前期(A)组、动情期(B)组、动情后期(C)组和动情间期(D)组分组,每组6只,灌注固定后取子宫,石蜡包埋,制片,采用免疫组织化学SP法染色。结果子宫各层均有5-色胺阳性物质得表达。广泛分布于内膜层、肌层和外膜,外纵肌层和内膜层着色最深,而内环肌层相对来说着
通过半定量RT-PCR技术研究了ghrelin mRNA在苏钟母猪发情周期不同阶段下丘脑-垂体-卵巢轴的表达,20头苏钟母猪(体重75±5 kg)分为4个组,即发情前期组(发情周期的第19天)、发情期组(发情周期的第21天)、发情后期组(发情周期的第3天)和间情期组(发情周期的第13天)。每组5头。结果表明下丘脑、垂体和卵巢ghrelinmRNA在母猪发情周期不同阶段都有表达,并且在发情周期不同阶
为了探讨5-羟色胺(5-HT)、S-100蛋白、神经特异性烯醇化酶(NSE)和突触素(SYP)四种弥散性神经内分泌细胞标志物是否在黄体细胞中两两共存,本实验采用免疫荧光双标记法结合激光扫描共聚焦显微镜观察对四种弥散性神经内分泌细胞标志物的分布进行了检测。结果显示:S-100蛋白和SYP共同存于一个黄体细胞,表达呈强阳性,主要分布在黄体周边,占总阳性细胞的56.57%。S-100与5-HT和5-HT
目的:观察不同剂量大豆异黄酮对去卵巢大鼠小脑中ERα、NGF、IL-2、AR 4种物质mRNA表达规律的影响,探讨大豆异黄酮对小脑作用的机制和意义及其剂量关系。方法:建立去卵巢SD大鼠模型,运用免疫组织化学SABC法,通过补充不同剂量大豆异黄酮观察其对ERα、NGF、IL-2、AR mRNA在小脑中的表达和分布变化进行研究。以假手术组和去卵巢组作对照。结果:ERα、NGF、IL-2和AR mRNA
利用活体鸡脑内注射示踪物逆行标记视网膜节细胞(RGCs)胞体、与细胞内注射将标记细胞全树突野可视化相结合,根据其胞体和树突野的大小和树突分支特征,研究鸡投射至丘脑的RGCs细胞类型。结果显示,鸡投射至丘脑的RGCs分为3亚群,且各群细胞树突分支简单,均为简单型,即小细胞体和小树突野的Ⅰs亚群细胞、中等细胞体和树突野的Ⅱs亚群细胞、中等细胞体和大树突野的Ⅲs亚群细胞。各亚群的比例分别为Ⅰs 25%、