论文部分内容阅读
<正>目的通过建立PQ中毒大鼠模型,采用western实验方法检测中毒大鼠肺组织中Mfn2的表达情况,联系透射电镜察看肺组织超微结构的变化趋势,以组成胶原纤维之羟辅氨酸的含量和肺组织masson染色结果反映肺纤维化的治疗。探讨血必净减轻百草枯中毒大鼠肺间质纤维化的疗效及百草枯致肺纤维化机制中又一可能的触发点。方法采用雄性Wistar大鼠,随机分为PQ中毒组(PQ组),PQ中毒十血必净解救组(PX组)和正常对照组(C组)三大组,每组设1d,3d,7d,14d四个观察时间。其中PQ组对大鼠采取灌胃法造模(PQ 50mg/kg),C组给予1ml蒸馏水灌胃。PX组于染毒后30min给予血必净腹腔注射4ml/kg,2次/d,间隔12h,PQ组和C组大鼠个灌胃后30min以生理盐水4ml/kg腹腔注射,2次/d。于各观察时间点第二次干预后30min处死大鼠,取肺组织样本分别进行Western蛋白电泳,羟辅氨酸定量,电镜超微检测及Masson,HE染色。结果(1)肺组织HE染色中PQ组3d时炎症表现最重;7d以后,肺泡腔内渗出液开始机化,纤维细胞肥大,分泌纤细的胶原纤维,可见肺泡腔内纤维化;14d成纤维细胞大量增生,肺泡结构萎陷、破坏,胶原沉积,肺纤维化初步形成。各时点PX组病理变化较PQ组程度较轻。(2)Masson染色可见PQ组14d时肺纤维化程度明显重于C组和PX组,染毒组肺泡炎、肺纤维化程度明显高于C组。(3)PQ组7d,,14d肺组织羟脯氨酸(HYP)含量与C组相比明显增高(P<0.01)。PX组与PQ组相比,7d,14d时HYP含量明显低于PQ组(P<0.05)。(4)电镜观察:PQ组14d线粒体相对较少,多发尘变性,肿胀和破坏;肺组织局部基膜卷折,肺泡塌陷,间质胶原纤维增多,局部纤维化逐渐明显;各种表现较PX组严重。(5)PX组Mfn2持续高表达,而PQ组各时点Mfn2表达逐渐升高,14d的表达量超出PX组,C组各时点表达量相对较低。结论血必净能减少百草枯中毒引起的肺部炎症反应,减轻肺纤维化,降低病情严重程度,作用机理为调节Mfn2基因的表达量,使其表达增加。