【摘 要】
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杆状病毒AcMNPV侵染宿主细胞后,翻译起始因子eIF2的α亚基(eIF2α)会被eIF2α激酶磷酸化,抑制翻译起始,降低蛋白的合成,作为宿主细胞的一种抗病毒机制.杆状病毒的Ac-PK2蛋白可以通过竞争性的与eIF2α激酶结合形成异源二聚体,抑制其磷酸化eIF2α.对Ae-PK2蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的功能做了深入分析,明确了其对宿主细胞蛋白合成、能量代谢以及细胞凋亡的影响.首先,利用Bac
【机 构】
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山西大学生物技术研究所,化学生物学与分子工程教育部重点实验室,太原030000
【出 处】
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第十三届全国青年植保科技创新学术研讨会暨全国植物保护博士后论坛
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杆状病毒AcMNPV侵染宿主细胞后,翻译起始因子eIF2的α亚基(eIF2α)会被eIF2α激酶磷酸化,抑制翻译起始,降低蛋白的合成,作为宿主细胞的一种抗病毒机制.杆状病毒的Ac-PK2蛋白可以通过竞争性的与eIF2α激酶结合形成异源二聚体,抑制其磷酸化eIF2α.对Ae-PK2蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的功能做了深入分析,明确了其对宿主细胞蛋白合成、能量代谢以及细胞凋亡的影响.首先,利用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒重组表达系统构建了过表达Ac-PK2的重组病毒AcMNPV-PK2-EGFP,并通过实时荧光定量PCR检测了AcMNPV和AcMNPV-PK2-EGFP侵染sf9细胞过程中Ac-pk2基因转录水平表达谱的变化,结果表明AcMNPV-PK2-EGFP处理组Ac-pk2基因的转录水平从24h开始明显高于野生处理组.荧光显微镜观察与Western blot分析结果显示,AcPK2-EGFP的表达量随着感染时间的延长而逐渐增加,随着Ac-PK2-EGFP表达量的增加,eIF2α的磷酸化逐渐减少,说明过表达Ac-PK2蛋白可以抑制eIF2α的磷酸化.
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