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目的衢枳壳为芸香科植物常山胡柚的干燥未成熟果实,主产于浙江省衢州市常山县,2018年入选了新"浙八味"中药材。课题组前期研究证实,衢枳壳提取物(QFAE)可以有效缓解脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI),本研究,我们将从MAPK/NF-κB/AMPK三条通路来探讨QFAE在LPS诱导的ALI小鼠中的抗炎机制。方法60只雄性SPF级ICR小鼠随机分成6组,即空白对照组(蒸馏水21mL/kg)、药物对照组(QFAE 21g/kg)、模型对照组(LPS)、低剂量组(QFAE 7g/kg+LPS)、高剂量组(QFAE21g/kg+LPS)、阳性对照组(地塞米松5mg/kg+LPS),每组10只。第0-2天,除阳性对照组外,各组小鼠均灌胃给予相应剂量药物。阳性对照组小鼠仅在第2天腹腔注射相应剂量的药物。第2天各组给药1小时后,全部小鼠用1%戊巴比妥钠浅麻,模型对照组、低剂量组、高剂量组及阳性对照组经鼻滴入20μg/50μL LPS诱导ALI模型,空白对照组及药物对照组经鼻滴入50μL蒸馏水。第3天,处死小鼠并收集血液、肺泡灌洗液(BALF)及肺组织。ELISA检测BALF上清中IL-6、IL-1β、TNF-α及IL-10的水平,计数BALF中中性粒细胞及巨噬细胞数目,显微镜检测肺脏的病理组织学改变,Western blot和免疫组化检测肺组织中ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、p38、p-p38、AMPKα、p-AMPKα、ACC、pACC、p65、p-p65、IκBα、p-IκBα及MPO等蛋白表达量。结果结果显示QFAE可以显著性降低ALI小鼠BALF中由LPS引起的IL-6、IL-1β及TNF-α等促炎因子水平的升高,并显著性升高抗炎因子IL-10的水平且可以明显减少ALI小鼠BALF中由LPS引起的中性粒细胞及巨噬细胞的增加。病理检查显示QFAE有效改善了ALI小鼠肺组织中由LPS引起的肺泡破裂、肺出血及炎症细胞浸润。Western blot和免疫组化结果显示,LPS诱导后小鼠肺组织中p-ERK、p-JNK、p-p38、p-p65、p-IκBα的表达明显升高,而给与QFAE后能明显抑制p-ERK、p-JNK、p-p38、p-p65、p-IκBα水平,说明QFAE抑制ALI与MAPK和NF-κB信号通路有关;同时LPS诱导后小鼠肺组织中p-AMPKα和p-ACC的表达明显降低,而QFAE则明显上调AMPKα及ACC的磷酸化水平,说明QFAE抑制ALI还与AMPK信号通路有关。结论 QFAE可以有效改善LPS诱导的小鼠急性肺损伤,其抗炎机制与MAPK/NF-κB/AMPK通路有关。