在HepG2细胞中11β-HSD1通过SREBP1调控脂代谢

来源 :2014年第十二届全国脂质与脂蛋白学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tprgaefe
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目的:通过在HepG2细胞中高低表达Ⅰ型羟基固醇脱氢酶(1 1beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 1,11β-HSD1),分析其影响脂代谢的分子机制.方法:1、用肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor Alpha,TNFα)处理HepG2细胞,TNFα工作浓度为5 ng/ml、10 ng/ml、1 5 ng/ml、20 ng/ml、25 ng/ml、30 ng/ml、35 ng/ml、40 ng/ml,处理时间为24小时,检测11β-HSD1和三酰甘油主调控基因固醇调节原件结合蛋白Ⅰ (Sterol regulatory elementbinding protein-1,SREBP1)和脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)的变化;2、用浓度为100 nM的地塞米松(Dexamethasone,Dex)处理HepG2细胞48小时,也检测上述指标的变化;3、在HepG2中采用慢病毒Len-11βHSD1过表达、shRNA-11βHSD1低表达该基因,并在48小时后检测11β-HSD1、SREBP1和FAS在蛋白质水平和mRNA水平的变化.
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