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目的:探讨半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2受体)对Aβ诱导的大鼠皮层混合细胞中神经元损伤的调节作用及机制.
方法:体外培养大鼠原代皮层混合细胞,Aβ1-42处理后,以MTT还原法/LDH释放测定观察神经元存活或损伤,通过RT-PCR和Western blotting分别检测半胱氨酰白三烯受体2 mRNA水平和蛋白水平的表达,以PI/Hoechst33342染色观察细胞凋亡/坏死,以免疫荧光共染PI/NeuN观察神经元损伤,以LTD4、NMLTC4、CysLT1受体拮抗剂Pranlukast、CysLT2受体拮抗剂HAMI 3379进行干预处理。
结果:Aβ1-42处理后,细胞出现凋亡和坏死,CysLT2受体mRNA和蛋白表达上调;LTD4、NMLTC4诱导皮层混合细胞损伤;HAMI3379能减轻Aβ1-42、LTD4或NMLTC4诱导的皮层混合细胞损伤。免疫共染色结果显示,Aβ1-42主要诱导神经元损伤,HAMI 3379显著减轻Aβ1-42诱导的神经元损伤。Pranlukast对NMLTC4诱导的皮层混合细胞损伤没有影响。
结论:CysLT2受体可能参与Aβ诱导的神经元损伤的调节,CysLT2受体拮抗剂对AD样损伤具有一定的保护作用。