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[目的]探讨钙蛋白酶抑制剂Calpeptin对丙烯酰胺(ACR)诱导神经干细胞(NSCs) Ca2+浓度和Calpain活性升高的干预作用.[材料和方法]取出生24小时内Wistar新生大鼠,无菌条件下取出脊髓背根神经节,获取原代NSCs,体外培养于完全培养基(DMEM/F 12+ 10％胎牛血清),37℃、5％ CO2条件下培养,3天换液一次,细胞传代并应用免疫荧光染色方法进行细胞鉴定.将所培养NSCs分为对照组(完全培养基)、抑制剂组(Calpeptin 4 μ mol/L)、ACR中毒模型组(ACR 760 μ mol/L)及干预组(ACR 760 μ mol/L+ Calpeptin4 μ mol/L),培养48h后,采用MTT法测定细胞存活率,建立染毒及干预模型.收集各组NSCs,制备浓度为105-7个/ml细胞悬液,Fura-2/AM负载法进行细胞内Ca2+浓度的测定.收集各组NSCs,利用BCATM蛋白定量试剂盒,测定样品蛋白含量,利用Calpain Substrate Ⅱ作为底物测定荧光强度,利用荧光光度计底物剩余法测定Calpain酶活性.[结果]对照组、抑制剂组、ACR中毒模型组及干预组各组细胞存活率分别为100.00％、96.33％、88.99％、97.37％.与对照组相比：抑制剂组、ACR中毒模型组、干预组的细胞存活率均低于对照组,其中ACR中毒模型组与对照组比较,差异有统计学意义(p＜0.05).与ACR中毒模型组相比：干预组细胞存活率高于ACR中毒模型组,差异有统计学意义(p＜0.05).细胞内Ca2+浓度的测定,对照组、抑制剂组、ACR中毒模型组及干预组细胞内Ca2+浓度(nmol/L,n=8)分别为：208.85±4.49、203.21±7.99、308.09±6.10、234.78±9.31.与对照组比较：ACR中毒模型组、干预组细胞内钙离子浓度升高,差异有统计学意义(p＜0.05).与ACR中毒模型组比较：抑制剂组、干预组细胞内钙离子浓度均低于ACR中毒模型组,且差异有统计学意义(p＜0.05).Calpain酶活性测定,对照组、抑制剂组、ACR中毒模型组及干预组Calpain酶活性(ng AMC/mg protein,n=10)分别为：42.25±2.83、41.08±2.08、52.21±3.49、40.50±2.21.与对照组比较：ACR中毒模型组Calpain活性升高,且差异有统计学意义(P＜0.05).抑制剂组、干预组Calpain活性降低,但差异无统计学意义(p＞0.05).与ACR中毒模型组比较：抑制剂组、干预组Calpain活性均降低,且差异有统计学意义(p＜0.05).[结论]成功建立了ACR中毒及钙蛋白酶抑制剂Calpeptin干预的NSCs模型,Calpeptin对ACR所引起NSCs内Ca2+浓度和Calpain活性增高具有干预作用.