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【目的】研究氟咯草酮（Fluorochloridone,FLC）对原代大鼠睾丸支持细胞中血睾屏障（blood-testis barrier,BTB）结构蛋白表达水平的影响。【材料和方法】选取清洁级健康20日龄雄性SD大鼠,无菌取双侧睾丸,采用0.1%胶原酶和0.1%透明质酸酶两步酶消化法分离得到原代支持细胞与生精细胞,35℃,5%CO2培养3648小时后用20mM Tris（pH=7.4）低渗处理2.5min,去除残余的生精细胞,建立原代睾丸支持细胞培养体系。将已纯化并长势良好的细胞制作细胞爬片,采用油红0染色、Feulgen染色结合免疫荧光对培养的细胞进行鉴定,同时应用PCR检测细胞纯度。在此基础上,将低渗纯化后继续培养24h的支持细胞,用1、10、100μmol/L的FLC染毒24h,并同时设立0.1%DMSO溶剂对照组。采用cck8检测FLC染毒对细胞活力的影响;用western blot和RT-PCR分别检测BTB结构蛋白与mRNA表达水平;用流式细胞仪检测细胞内ROS水平。【结果】分离培养的细胞具有睾丸支持细胞的特征性结构脂质小滴和卫星小体,并呈Fas-L阳性,细胞纯度>95%。FLC在100μmol/L时可抑制细胞活力（p<0.001）,诱导细胞内ROS水平显著增加（p<0.001）。在1μmol/L浓度下,FLC可引起BTB紧密连接蛋白occludin和zo-1的mRNA表达升高（p<0.001或p<0.05）,而100μmol/L的FLC则显著下调occludin和zo-l的mRNA表达水平（p<0.001）;1、10、100μmol/L的FLC均可引起缝隙连接蛋白connexin-43的mRNA表达降低,且与对照组相比,差异具有统计学意义（p<0.05或p<0.001）;粘着连接蛋白N-cadherin的mRNA表达则不受FLC染毒的影响。FLC染毒对BTB结构蛋白表达水平的影响与其mRNA变化一致。【结论】采用0.1%胶原酶和透明质酸酶两步酶消化法及低渗处理可获得高纯度的睾丸支持细胞;FLC染毒可诱导原代大鼠睾丸支持细胞发生氧化应激,影响BTB结构蛋白与mRNA的表达水平。