【摘 要】
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本研究利用马尾松未成熟合子胚诱导的胚性愈伤组织,通过探讨初始接种量,继代细胞密度对悬浮培养细胞增殖的影响和悬浮培养细胞生长曲线的测定,建立了马尾松胚性愈伤组织悬浮
【机 构】
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中南林业科技大学林学院,长沙410004
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本研究利用马尾松未成熟合子胚诱导的胚性愈伤组织,通过探讨初始接种量,继代细胞密度对悬浮培养细胞增殖的影响和悬浮培养细胞生长曲线的测定,建立了马尾松胚性愈伤组织悬浮培养体系.研究结果表明,悬浮培养时初始接种量显著地影响着胚性细胞的增殖,且在每30ml新鲜培养基中,确定了最佳的初始接种量为1.0g,平均增殖系数达12.097±1.754;在继代时,同时考虑悬浮细胞增殖效率和胚性细胞的生长状态,继代时以1/6的继代细胞密度为宜;通过测定两个生长状态良好的胚性细胞系的生长曲线和细胞活力的动态变化,确定了马尾松胚性细胞悬浮培养的最佳继代间隔时间为10-14d.本研究首次成功建立马尾松胚性愈伤组织增殖悬浮培养体系,为马尾松优良无性系大量扩繁提供了技术基础,同时也为马尾松遗传转化技术提供了平台.
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