【摘 要】
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目的：应用麦胚无细胞蛋白表达系统,表达出恶性疟原虫环子孢子蛋白(Circumsporozoite protein,CSP).方法：依据PlasmoDB查得的恶性疟原虫Pf3D7株CSP蛋白基因序列,设计一对引物,经PCR扩增出C SP蛋白基因全序列.用NcoI与Sma Ⅰ双酶切后,与同样双酶切的pIVE X 1.3WG载体连接,转化大肠杆菌DH5 a株,获得pIVEX WG 1.3-CSP质粒.将
【机 构】
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华中科技大学同济医学院病原生物系,武汉,430000 中国药品生物制品检定所,北京100050
【出 处】
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2010年中国药学会大会生物制品研发新进展论坛暨生物制品专业委员会筹备会议
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目的：应用麦胚无细胞蛋白表达系统,表达出恶性疟原虫环子孢子蛋白(Circumsporozoite protein,CSP).方法：依据PlasmoDB查得的恶性疟原虫Pf3D7株CSP蛋白基因序列,设计一对引物,经PCR扩增出C SP蛋白基因全序列.用NcoI与Sma Ⅰ双酶切后,与同样双酶切的pIVE X 1.3WG载体连接,转化大肠杆菌DH5 a株,获得pIVEX WG 1.3-CSP质粒.将pIVEX WG 1.3-CSP质粒加入到麦胚表达系统进行表达,表达产物使用镍离子亲和层析柱纯化,获得重组CSP.结果：PCR成功扩增出CSP基因序列,成功构建pIVEX WG 1.3-CSP质粒,经WB验证,该重组质粒在麦胚表达系统中成功地表达了CSP.结论：使用麦胚系统表达的CSP,可用于疟疾诊断试剂和疫苗评价方面的研究.
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