鉴别JEV基因Ⅰ型和基因Ⅲ型的RT-LAMP检测方法的建立

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wywtqywqy
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  引言 流行性乙型脑炎又称日本乙型脑炎,是由日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)引起的一种媒蚊性人兽共患传染病.JEV分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V型,我国流行的主要基因型为Ⅰ型和Ⅲ型.本研究建立了JEV基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP检测方法,能够快速达到对JEV的检测及基因Ⅰ型和基因Ⅲ型的鉴别.材料与方法 分别设计1套JEV基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP引物并分别以基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV毒株抽提的RNA为模板,将扩增出的目的片段并克隆至pGEM T-Easy Vector,对得到的重组质粒进行线性化处理,命名为GⅠ-cRNA和GⅢ-cRNA.以G Ⅰ-cRNA和GⅢ-cRNA为模版与上述引物通过对不同反应条件的不断优化,确定最佳的反应条件,初步建立JEV基因Ⅰ型和基因Ⅲ型RT-LAMP检测方法并分别命名为GⅠ-RT-LAMP和GⅢ-RT-LAMP方法.
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引言/目的 新城疫(Newcastle disease,ND)是一种由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)强毒株引起的可导致多种禽类发病死亡的烈性传染病,被OIE列为必须上报的疾病之一。虽然NDV目前只有一个血清型,但根据基因组结构和遗传距离可将所有的毒株划分为ClassⅠ和ClassⅡ两大分支。目前所流行的强毒株和现阶段常用的弱毒疫苗毒株均属于ClassⅡ分支,C
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研究目的 利用平衡致死系统构建表达鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)的减毒鸡白痢沙门菌(Salmonella enteria serovar Pullorum,S.Pullorum)活载体疫苗株,并进一步研究该菌株的生物学及免疫学特性,为筛选合适的重组减毒沙门菌作为疫苗候选株提供一定依据.材料方法 本试验将PCR扩增出的HN基因片段克隆
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引言 为了探究PB2蛋白的第627位氨基酸对于人源的H3N2猪流感病毒的复制能力和致病力的影响,本实验构建了猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005 (H3N2)的反向遗传操作技术平台,以之为基础,通过细胞和小鼠上的实验来探究该病毒的PB2-627位由K突变为E后对其复制能力和致病力的影响。材料与方法 猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005 (H3
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