【摘 要】
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为建立一种快速、敏感、特异的猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)荧光定量RT-PCR(Fluorescence Quantitative RT-PCR,FQ-PCR)检测方法,本研究根据GenBank中CSFV E2基因序列保守片段,设计了一对CSFV特异性引物和一条特异性探针,经优化反应条件,建立CSFV FQ-PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、
【机 构】
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河南省动物疫病预防与控制中心,河南郑州,450008 河南科技大学动物科技学院,河南洛阳,4710
【出 处】
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河南省畜牧兽医学会暨饲料饲草学分会2015年度学术交流会
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为建立一种快速、敏感、特异的猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)荧光定量RT-PCR(Fluorescence Quantitative RT-PCR,FQ-PCR)检测方法,本研究根据GenBank中CSFV E2基因序列保守片段,设计了一对CSFV特异性引物和一条特异性探针,经优化反应条件,建立CSFV FQ-PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验,利用所建立的方法对临床疑似CSF感染样品进行了检测.结果表明,本研究成功建立的CSFV FQ-PCR检测方法在101～10(0)copies/μL模板范围内有很好的线性关系,所得相关系数为0.999;对CSFV细胞培养物出现阳性扩增信号,但ST细胞和其他8种病原对照未出现扩增,特异性良好;该方法重复性好、敏感性高,能检出模板最低浓度为10copies/μL,并且能检出1TCID50CSFV;自35份疑似CSFV感染样品中检出23份阳性,阳性率为65.7％,较普通RT-PCR检出率更高.本研究成功建立了CSFV FQ-PCR检测方法,为CSFV的早期检测提供了特异、灵敏、快速的方法.
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