【摘 要】
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本研究根据GenBank中已公布的牛源无乳链球菌SIP基冈序列抗原表位序列设计1对引物，以无乳链球菌分离菌株基因组DNA为模板，PCR扩增出SIP抗原表位序列。对其进行克隆、测序、转化、诱导表达及免疫活性鉴定。结果显示克隆的SIP基因抗原表位序列为897bp，编码299个氨基酸，与GenBank中公布的牛无乳链球菌SIP基因(AF151361)相似性为99.8[％]，氨基酸相似性为99.7[％]。
【机 构】
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内蒙古民族大学生命科学,通辽028043 内蒙古民族大学动物科技学院,通辽 028043 内蒙古民
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会
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本研究根据GenBank中已公布的牛源无乳链球菌SIP基冈序列抗原表位序列设计1对引物，以无乳链球菌分离菌株基因组DNA为模板，PCR扩增出SIP抗原表位序列。对其进行克隆、测序、转化、诱导表达及免疫活性鉴定。结果显示克隆的SIP基因抗原表位序列为897bp，编码299个氨基酸，与GenBank中公布的牛无乳链球菌SIP基因(AF151361)相似性为99.8[％]，氨基酸相似性为99.7[％]。经诱导后得到了可溶性高效表达，可溶性表达率达到48.7[％]，重组蛋白的分子量为40.3ku。经Ni2+亲和层析柱纯化得到纯度在90[％]以上的SIP蛋白，经Western-blot分析表明SIP蛋白显示出较强的免疫反应性。该项目研究为进一步研究奶牛乳腺炎无乳链球菌新型免疫抗原制剂，建立监测奶牛隐性乳腺炎抗体方法与乳中无乳链球菌的检测方法奠定了研究基础。
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