【摘 要】
：
目的 观察低剂量双酚A (BPA)对原代培养人前列腺成纤维细胞作用并探讨其可能作用机制.方法 手术获取的人前列腺组织,无菌条件下,称量,用含500 U/ml青链霉素PBS液漂洗后,剪成1mm3小块,经Ⅰ型胶原酶消化过夜后,过滤、离心获取前列腺细胞,接种于24孔板加入RMPI-1640培养并对细胞进行形态学和免疫组织化学鉴定.获取的人前列腺成纤维细胞分别接种于96孔板和24孔板培养12d后给予系列剂
【机 构】
：
上海市计划生育科学研究所,中国生育调节药物毒理检测中心,上海200032
【出 处】
：
2016(第二届)毒性测试替代方法与转化毒理学(国际)学术研讨会暨有害结局路径(AOP)与风险评估培训会议
论文部分内容阅读
目的 观察低剂量双酚A (BPA)对原代培养人前列腺成纤维细胞作用并探讨其可能作用机制.方法 手术获取的人前列腺组织,无菌条件下,称量,用含500 U/ml青链霉素PBS液漂洗后,剪成1mm3小块,经Ⅰ型胶原酶消化过夜后,过滤、离心获取前列腺细胞,接种于24孔板加入RMPI-1640培养并对细胞进行形态学和免疫组织化学鉴定.获取的人前列腺成纤维细胞分别接种于96孔板和24孔板培养12d后给予系列剂量BPA (10-11M-10-6M)处理72 h,利用CCK-8法检测前列腺成纤维细胞存活率,并进一步通过Giemsa染色后观察细胞生长及形态变化.研究同时利用qRT-PCR技术分析了1nM双酚A对人前列腺成纤维细胞PCNA、ER-α和ER-β基因表达的影响.结果 细胞鉴定结果显示,细胞角波形蛋白表达阳性,获取的细胞具典型成纤维细胞形态特征.CCK-8法检测结果显示,10-11M-10-6M BPA与前列腺成纤维细胞孵育72h后,10-11M-10-9M BPA能够促进前列腺成纤维细胞生长,且以10-9M BPA表现最为明显,进一步镜下观察结果显示,BPA未明显改变人前列腺成纤维细胞形态.RT-PCR结果显示,10-9M BPA上调人前列腺成纤维细胞PCNA和ER-α基因水平表达,下调ER-β基因表达水平.结论 低剂量BPA体外能促进人前列腺成纤维细胞增殖,BPA对前列腺成纤维细胞ER基因表达影响可能介入该增殖过程.
其他文献
在液体环境下，生物体对流体方向的感知十分重要，有些需要逆流而上满足生理需求(称为趋流性)，另一些却恰好相反[1]。秀丽隐杆线虫在液体环境下会表现出趋流性的特征[2]。然而线虫在各种流速下选择的偏好性鲜有报道，内在神经机制和信号传导需用光学分子成像来实现。在微环境下，比如血管、内脏中寄生虫藏匿的位置和如何定位和治疗让选择的偏好性显得尤为重要。本文采用微流控芯片用于线虫的流速偏好性实验，观察线虫在不同
毒理学关注阈值(Threshold of Toxicological,TTC)是毒理学风险评估的新工具之一.它根据化学品致突变性警示或其基本结构特性将化学物分成几大类,然后再确定相关的安全阂值.它可以通过已知毒性来确定未知毒性.当某化学物缺乏相关毒性资料,且人体暴露水平很低时,可运用TTC方法对该化学品进行评估.2007年COLIPA组织的专家组建议可以用TTC原则对化妆品成分进行安全评价.201
Functional genomics approaches have shown to be a useful tool in determining the molecular fingerprint which due to the lack of associated functions could alter the toxicity sensitivity to chemicals a
目的 探讨长链非编码RNA (LncRNA) HOTAIR调控EMT和肿瘤干细胞(CSCs)特性获得在香烟烟雾抽提物(CSE)所致肺支气管上皮(HBE)细胞恶性转化中作用及其分子过程.方法 20 μg/mL CSE急性处理HBE细胞1、3、6、12和24 h,实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞LncRNA HOTAIR水平,Western blot检测细胞STAT3水平及磷酸化程度；观察通过
With a view to REACH and the need of reducing, refining and replacing the use of experimental animals for safety testing (3Rs), this project aims to develop an altemative in vitro battery for estrogen
One major aspect of innovation by the fragrance industry is the discovery of new materials as fragrance ingredients to impart novel and superior consumer experiences.Fragrance ingredients are widely u
目的 近年来我国大气污染严重,PM2.5水平严重超标,研究发现PM2.5暴露与人的呼吸系统、心血管及免疫系统等疾病发生密切相关.研究表明PM2.5对人体作用机制主要为氧化应激、炎症反应以及遗传损伤等,但具体的信号通路和机制并不完全明确,尤其是引起的细胞损伤及凋亡作用.本课题采用PM2.5刺激人皮肤表皮细胞(Kertinocytes,KC细胞),探讨PM2.5对细胞毒性,并分析在细胞凋亡中作用及相关
目的 评估和验证基于EpiOcular体外重组类似人角膜上皮细胞模型的眼刺激替代方法用于化妆品、化学品的皮肤致敏性的测试.方法 参照OECD492-2015测试方法,选用12种己知化学物包括乙酸甲酯、氯已定、草酸钠、胡椒基丁醚等对EpiOcular模型方法进行验证,其中固体3种,液体9种.EpiOcular模型接收后放至37℃、5％CO2孵育过夜平衡.对于液体受试物,每孔加入50μL受试物,每组设
Epidemiology studies suggest that maternal smoking and passive smoking have strongly resulted in the occurrence of congenital heart defects (CHD) in offspring.Cigarette smoke (CS) can be divided into
Fine particulate matter (PM2.5) is a major component of air pollutions that are closely associated with increased risk of lung cancer.Previous studies based on acute changes in molecular biology and g