论文部分内容阅读
目的: 建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157：H7的多重PCR方法。方法: 根据GenBank上已发表的大肠杆菌O157：H7菌体抗原和鞭毛抗原的基因序列(rfbE和fliC基因)设计两对特异引物，分别建立了针对rfbE、fliC基因的单一PCR方法;通过优化扩增条件，成功地建立了可用于动物粪便检测的大肠杆菌多重PCR方法，并进行了特异性和灵敏性试验，同时还初步应用到临床样品的检测中。结果: 本试验所建立的多重PCR方法能同时扩增出rfbE基因(327 bp)和fkiC基因(247 bp)的特异性片段，特异性结果显示其它非大肠杆菌O157：H7的扩增结果均为阴性，表明该方法有较高的特异性;灵敏度试验结果显示细菌纯培养物的检测灵敏度为102 cfu/mL。结论: 初步建立了快速、灵敏、特异的检测大肠杆菌O157：H7的多重PCR方法，为从动物粪便中分离鉴定大肠杆菌O157∶H7提供了一种简单、灵敏的试验方法，可用于临床动物携带大肠杆菌O157：H7的分子流行病学调查。