【摘 要】
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目的 研究关节液及关节软骨中H2S及其合成酶的含量及其变化,研究H2S对IL-1β诱导的软骨细胞MMP-13表达情况的影响。方法 收集在北京大学第一医院行膝关节手术(关节镜手术
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目的 研究关节液及关节软骨中H2S及其合成酶的含量及其变化,研究H2S对IL-1β诱导的软骨细胞MMP-13表达情况的影响。方法 收集在北京大学第一医院行膝关节手术(关节镜手术或膝关节置换术)患者的关节液及废弃的关节软骨,用亚甲基蓝法检测退变膝关节中关节液H2S的含量;从废弃的关节软骨中分离出相对正常的软骨细胞,用H2S分子探针方法检测软骨细胞中有无内源性H2S存在,用免疫细胞化学方法检测软骨细胞中有无H2S合成酶CBS、CSE、MPST的存在;用Western Blot方法检测H2S合成酶CBS、CSE、MPST在不同退变程度的软骨组织中的含量。培养相对正常的人软骨细胞至P2代,予5ng/ml的IL-1 β或200μM的NaHiS处理24h,Western Blot法检测各组细胞MMP-13蛋白、总NFκ B p65及磷酸化NF-κ B p65蛋白的含量,real-time PCR检测各组细胞MMP-13基因的转录情况。
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