【摘 要】
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背景与目的:透明质酸参与了多种肿瘤细胞增殖和侵袭行为.Layilin是一种新发现的特异性透明质酸受体,在发现Layilin表达于人肺腺癌组织和A549细胞株的前期工作基础上,本研究观
【机 构】
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第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所,重庆,400037
【出 处】
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2006’亚太地区国际肿瘤生物学和医学会议首届中国中青年肿瘤专家论坛暨全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会
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背景与目的:透明质酸参与了多种肿瘤细胞增殖和侵袭行为.Layilin是一种新发现的特异性透明质酸受体,在发现Layilin表达于人肺腺癌组织和A549细胞株的前期工作基础上,本研究观察了用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术抑制Layilin表达后,对人肺腺癌A549细胞体外增殖和侵袭、移植瘤生长和淋巴道转移,以及对荷瘤鼠生存期的影响.方法:构建能表达针对Layilin的小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)的RNA干扰载体(LayilinsiRNAVector)和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNA干扰载体(ControlsiRNAVector),分别转染A549细胞,新霉素抗性筛选得到Layilin表达受抑制的A549-siLayilin细胞和Layilin表达未受影响的A549-siControl细胞.针对非转染(A549-nontransfection)、A549-siLayilin、A549-siControl三组细胞,分别采用RT-RealtimePCR和Westernblot技术检测Layilin表达,用MTT比色试验和Boyden小室实验检测细胞体外增殖和侵袭能力.针对三组细胞种植裸鼠形成的移植瘤,分别采用背部皮下种植侵袭模型和爪垫皮下种植淋巴结转移模型,检测它们生长、侵袭和经淋巴道转移能力的差异,以及对荷瘤裸鼠生存期的影响.结果:与A549-nontransfection组和A549-siControl组相比,A549-siLayilin组细胞Layilin表达减少,体外增殖和侵袭能力降低,在裸鼠内形成的移植瘤潜伏期延长,生长变慢,淋巴转移率下降,其荷瘤鼠生存期相对较长.结论:通过RNA干扰抑制Layilin表达后,能显著抑制HA所诱导的A549细胞体外增殖和侵袭,抑制A549细胞裸鼠移植瘤生长与淋巴道转移,并延长荷瘤鼠的生存期.本研究为通过RNA干扰手段抑制Layilin表达,进而抑制肺腺癌增殖、侵袭和经淋巴道转移提供了有益的思路.
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