【摘 要】
:
以不同烟草花叶病抗的种质为试验材料,通过同源克隆法克隆烟草抗花叶病基因.根据GenBank上登录的抗花叶病基因(CN)的核苷酸序列设计一对特异引物对不同烟草种质的基因组DNA进行PCR扩增,共检测出19条抗病谱带,并回收纯化PCR产物进行测序分析,其核苷酸保守序列与其它抗花叶病基因的保守序列具有较高的同源性,达88%.根据克隆的CN设计的特异引物对一些烟草种质进行抗TMV的研究,分子鉴定结果和田间
【机 构】
:
福建农林大学生命科学学院,福州350002 福建农林大学作物科学学院,福州350002
【出 处】
:
第四届全国植物生物技术及其产业化大会
论文部分内容阅读
以不同烟草花叶病抗的种质为试验材料,通过同源克隆法克隆烟草抗花叶病基因.根据GenBank上登录的抗花叶病基因(CN)的核苷酸序列设计一对特异引物对不同烟草种质的基因组DNA进行PCR扩增,共检测出19条抗病谱带,并回收纯化PCR产物进行测序分析,其核苷酸保守序列与其它抗花叶病基因的保守序列具有较高的同源性,达88%.根据克隆的CN设计的特异引物对一些烟草种质进行抗TMV的研究,分子鉴定结果和田间鉴定结果一致性达66.7%.研究结果为进一步鉴定和抗烟草花叶病种质资源利用奠定了基础.
其他文献
游走目纤毛虫是一类常见于鱼类和软体动物等体表的寄生原生动物,已给水产养殖业带来了重大的经济损失,故对其研究具有理论和经济双重意义.随着纤毛虫系统分类学研究的深入,游走类的系统地位问题已成为研究者近年来争论的焦点问题之一.
目的:重组表达刚地弓形虫ME49株缓殖子期特异性抗原SRS9基因,初步分析其免疫特性.方法:根据SRS9基因序列设计合成引物,应用PCR技术从弓形虫ME49株基因组DNA中扩增出SRS9基因片段,分别将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)、 pET-22b(+)及pET-28a(+)中,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western
在本研究中,建立了一种检测隐孢子虫的LAMP方法.基于隐孢子虫数个种类的小亚基核糖体RNA(18S rRNA)基因片段设计引物,建立的LAMP方法可检测微小隐孢子虫(C.parvum)、贝氏隐孢子虫(C.baileyi)、鼠隐孢子虫(C.muris)、安氏隐孢子虫(C.andersoni)以及隐孢子虫禽基因型五(avian genotype Ⅴ).该LAMP方法优化后,可使用SYBR Green
2006年9月至2007年8月,对河南省规模化鹌鹑养殖场进行了隐孢子虫流行病学调查.共检查来至河南省5个地区47个养殖场的1818份鹌鹑粪便样品,隐孢子虫平均感染率为13.1%(95%置信区间13.1±1.6%)(29个阳性场),其中72-100d鹌鹑具有最高的感染率(23.6%,95%置信区间23.6±2.6%)(x2=64.91;P<0.01).
为基因分型河南省奶牛源十二指肠贾第虫分离株,使用基于16S核糖体RNA(16S rRNA)、β贾第素(bg)、谷氨酸脱氢酶(gdh)和磷酸丙酮异构酶(tpi)基因的多位点序列分型技术.
本研究首先构建含贾第虫组织蛋白酶B基因短反义序列和长反义序列的微型核酶嵌合型犬贾第虫病毒重组质粒.将微型核酶嵌合型犬贾第虫病毒重组质粒线性化后体外转录为mRNA,然后用微型核酶体外切割组织蛋白酶B基因转录体,采用荧光定量PCR检测体外切割效率.
在本研究中,采用多位点序列分析工具(MLST)对来至我国不同动物来源的9个鼠隐孢子虫(C.muris)和43个安氏隐孢子虫(C.andersoni)进行了亚型分型.在4个位点(MS1,MS2,MS3,MS16)上,C.muris发现1-2个亚型,C.andersoni存在2-6个亚型,其中9个亚型为新亚型.
车轮虫是海水养殖中常见的危害性原生动物.近年来,在南中国海地区由寄生原生动物引起的养殖鱼类和野生鱼类大批死亡的现象时常发生.然而,我国在南中国海地区几乎没有车轮虫分类学的研究的报道.
本研究中,对来至中国、瑞典和埃及的不同动物源111个微小隐孢子虫(C.parvum)Ⅱd分离株进行了多位点序列分型.在12个微卫星、小卫星和单核苷酸多态性位点,分别形成了1-11个亚型,共构成25个多态性序列类型(MLST).
DNA甲基化是指在甲基化酶(DNA methyltransferase,DNMT)的作用下,将1个甲基添加在DNA分子的碱基上.DNA甲基化可引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而调控基因表达.