【摘 要】
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为探索新型高效安全的猪蓝耳病疫苗免疫佐剂,本实验用离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒包裹猪融合基因PIL-46和CpG基序的真核表达质粒(CNP-(VRIL-46+VRlC)),将CNP-(VRIL-46+VRlC)肌注接种过猪蓝耳病灭活苗的长白川白杂交猪,接种后1、2、4、6和8周采取实验猪静脉血,用Sandwich ELISA检测血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6和IgG、IgA、I
【机 构】
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四川大学生命科学学院动物疾病防控与食品安全重点实验室,成都,610064 四川省动物疾病预防控制中
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会
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为探索新型高效安全的猪蓝耳病疫苗免疫佐剂,本实验用离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒包裹猪融合基因PIL-46和CpG基序的真核表达质粒(CNP-(VRIL-46+VRlC)),将CNP-(VRIL-46+VRlC)肌注接种过猪蓝耳病灭活苗的长白川白杂交猪,接种后1、2、4、6和8周采取实验猪静脉血,用Sandwich ELISA检测血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6和IgG、IgA、IgM及特异抗体的含量,同时检测外周血液免疫细胞数量的变化。结果发现实验猪接种CNP-(VRIL-46+VRlC)后1-8周内,其血清中IL-2、IL-4、IL-6和IgG、IgA、lgM及特异抗体的含量较对照组均显著增多(P<0.05),淋巴细胞和单核细胞数量也明显升高(P<0.05),这些表明接种CNP-(VRIL-46+VRlC)的实验猪的特异体液和细胞免疫水平均显著多于对照组,提示PIL-46基因和CpG基序组合能显著增强猪的特异体液和细胞免疫机能,明显提高其免疫防御力,具有研制为高效安全的分子免疫增强剂的应用前景。
其他文献
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猪圆环病毒2型(PCV2)是与猪的一种新的传染病-断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystetmicwasting syndrome,PMWS)密切相关,该病以进行性消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、发育迟缓及皮肤苍白等为主要特征。PCV-2广泛存在于世界很多的养猪国家和地区。到目前为止,还没有有效的疫苗来预防此疾病,因此PCV-2成了近几年国内外兽医领域关注的研究热点之一。
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根据PRRSV VR-2332毒株核苷酸序列,设计针对M基因的特异引物,以PRRSVJL/07/SW毒株细胞培养物为模板,利用RT-PCR方法,成功扩增出M基因,将该基因与原核表达载体pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL-21,经IPTG诱导表达。测序结果表明：M基因全长525bp,编码174个氨基酸,经同源性比较及进化树分析该毒株属于美洲型。表达产物经SDS-PAGE及Western blo
根据PRRSVVR-2332毒株核苷酸序列,设计针对GP5基因的特异引物,以PRRSVJL/07/SW毒株细胞培养物为模板,利用RT-PCR方法,成功的扩增出GP5基因,将该基因与真核表达载体pCI-neo连接,转染Marc-145细胞中,用间接免疫荧光试验、SDS-PAGE和western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果：RT-PCR分别扩增出GP5基因大小与预期一致,与国际PRRSV美洲型V
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