【摘 要】
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CPPU (N-(2-chloro-4-pyridyl)-N-phenylurea,英文通用名：forchlorfenuron) 是一种吡啶取代脲类衍生物,具有诱导植物愈伤组织生长、促进芽的发育及种子的萌发,保绿和延缓衰老等生理活性.本课题组在先前的田间和室内试验研究发现,一定浓度的CPPU处理能显著促进小麦的分蘖.为从分子水平上探索其机理,本研究通过蛋白质双向电泳和质谱技术,分析了CPPU处理引
【机 构】
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山东农业大学农学院,山东泰安271018
【出 处】
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第三届全国小麦基因组学及分子育种大会
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CPPU (N-(2-chloro-4-pyridyl)-N-phenylurea,英文通用名：forchlorfenuron) 是一种吡啶取代脲类衍生物,具有诱导植物愈伤组织生长、促进芽的发育及种子的萌发,保绿和延缓衰老等生理活性.本课题组在先前的田间和室内试验研究发现,一定浓度的CPPU处理能显著促进小麦的分蘖.为从分子水平上探索其机理,本研究通过蛋白质双向电泳和质谱技术,分析了CPPU处理引起的小麦差异表达蛋白,鉴定出两个与生长素和细胞分裂素合成有关的蛋白小麦黄素单加氧酶TaYUCCA1和小麦tRNA异戊烯基焦磷酸转移酶TatRNA IPT.进一步克隆了这两个蛋白的编码基因.TaYUCCA1基因编码382个氨基酸残基,TatRNA IPT基因编码466个氨基酸残基.这两个基因编码的蛋白均不含有信号肽,可能在细胞质中行使功能.聚类分析表明TaYUCCA1与短柄草BdYUCCA10具有较高的相似性,TatRNA IPT与已报道的水稻OstRNA IPT具有较高相似性.将小麦萌发胚的不同提取RNA部分做RT-PCR分析,结果表明与芽尖和芽中间部位相比,分蘖部位和根部TaYUCCA1基因的表达量较高.构建了TaYUCCA1植物表达载体并通过农杆菌浸花法转化拟南芥,获得转TaYUCCA1拟南芥植株.与野生型相比,转基因拟南芥出芽较野生型晚,下胚轴明显伸长且叶子卷曲,植株明显增高并有花粉败育现象.为深入研究基因的功能和利用基因进行小麦改良奠定了基础.
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