【摘 要】
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目的：通过本研究来分离培养和鉴定人关节液间充质干细胞,基于Flowsight？图像流式细胞技术,比较早期和晚期骨关节炎患者关节液间充质干细胞比例的差异.方法：(1)取人关节液后,采用贴壁法进行细胞培养,镜下观察关节液间充质干细胞形态.5％ CO2、37℃恒温箱中培养28天,至细胞铺满培养瓶底后,使用PE-CD44、FITC-CD90、APC-CD73、PerCP-Cy5.5-CD105、eFluo
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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目的：通过本研究来分离培养和鉴定人关节液间充质干细胞,基于Flowsight？图像流式细胞技术,比较早期和晚期骨关节炎患者关节液间充质干细胞比例的差异.方法：(1)取人关节液后,采用贴壁法进行细胞培养,镜下观察关节液间充质干细胞形态.5％ CO2、37℃恒温箱中培养28天,至细胞铺满培养瓶底后,使用PE-CD44、FITC-CD90、APC-CD73、PerCP-Cy5.5-CD105、eFluor 450-CD34、APC-eFluor 780-CD45这6种荧光抗体标记细胞,应用FlowSight？流式细胞仪鉴定关节液间充质干细胞,并观察其单细胞形态和荧光染色情况.(2)根据患者术前下肢全长和膝关节侧位X线片,依据骨关节炎的Kellgren与Lawrence(K-L)影像学分期方法,将患者分为早期OA组(17例)和晚期OA组(26例).取患者的关节液后,一半关节液不经过培养,直接使用图像流式细胞技术检测间充质干细胞的比例；另一半关节液进行分离培养,28天后检测关节液中间充质干细胞的比例,评估关节液间充质干细胞比例与膝关节骨关节炎影像学分期及其他因素的相关性.结果：关节液中的细胞进行培养后,显微镜下可见细胞呈纺锤形,有集落形成,符合间充质干细胞的外观特征.图像流式细胞仪中可见分离出的间充质干细胞的单细胞图像和荧光染色照片,关节液间充质干细胞在表面标志物中表达CD44、CD90、CD73、CD105,不表达CD34和CD45.新鲜的关节液中,晚期OA组SF-MSCs占总细胞的比例高于早期OA组(2.05％±0.64 vs 3.18％±0.92, P＜0.01).细胞培养后,两组SF-MSCs的比例仍有差异(47.15％±14.36 vs 57.64％±10.84, P＜0.01).SF-MSC比例与年龄、BMI、HSS评分等因素无相关性.结论：本实验证实了关节液中存在间充质干细胞,且首次运用多通道图像流式细胞技术,更加直观、准确地鉴定了间充质干细胞.骨关节炎的关节液间充质干细胞比例与骨关节炎进展程度具有相关性,原因可能是软骨自身修复和愈合的反应在晚期骨关节炎中更为活跃.
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目的：探讨前路手术治疗早期下颈椎骨折脱位伴关节突绞锁的可行性及临床效果并探讨手术技巧，迅速、安全恢复颈椎序列，重建颈椎稳定性，简化治疗过程，提高治疗水平，提供脊髓恢复机会，指导临床工作。
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