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促分裂素原活化蛋白激酶(Mitogen-activatedproteinkinases,MAPK)级联信号系统在真核生物进化中相对保守,在信号传导路径中起重要作用。已经鉴定的16个番茄MAPK可划分为A、B、C、D等4类,其中番茄MAPK6基因(SlMAPK6)属于B类,编码的氨基酸序列具有MEY基序的loop环,目前关于SlMAPK6的功能仍然未知,本研究的目的是探明SlMAPK6在番茄植株生长发育中的功能与作用。以‘矮番茄’为研究材料,选取SlMAPK6外显子区域的3个靶点,Target1:GGAGAATACAATGA CACGGGTGG,Target2:GATAAAGCTTCTCAGTCACATGG,Target3:TCACAAGTAGTCAGTCGAC AACC,通过CRISPR/Cas9基因敲出技术与农杆菌介导技术获得SlMAPK6敲除株系;通过CTAB法提取植株总DNA,PCR技术与Sanger测序鉴定突变位点是否成功突变。Trizol提取总RNA,去除DNA后反转录成cDNA进行定量RT-PCR,检测野生型番茄(WT)中SlMAPK6组织特异性表达以及WT、敲除株系中独脚金内酯合成相关基因SlCCD7、SlCCD8,赤霉素(GA)合成相关基因GA20ox3、GA3ox1和GAI,细胞伸长基因PRE1、PRE2和PRE,腋芽发育相关基因Ls、BL和BRC1b/TCP8的转录水平,以SlEF为内参基因。结果表明:SlMAPK6在‘矮番茄’茎、叶和花中表达量相对较高,而在根、萼片和果实中较低,推断其在茎、叶和花发育中发挥重要作用。通过农杆菌介导的番茄遗传转化获得12株阳性植株,Sanger测序比对结果显示2个株系CRISPR-3和CRISPR-7为纯合突变体,CRISPR/Cas9载体在番茄上的突变效率为16.67%。表型观察发现,纯合突变株系CRISPR-3和CRISPR-7均表现出腋芽数增多(分别为15和16个)、茎增粗、真叶数增多以及小叶变长等表型特征,野生型番茄(WT)的腋芽数为0,结果暗示SlMAPK6突变促进番茄植株腋芽的发生。SlMAPK6敲除株系CRISPR-3和CRISPR-7叶片中独脚金内酯合成相关基因SlCCD7、SlCCD8,GA合成基因GA20ox3、GA3ox1,以及细胞伸长基因PRE1、PRE2和PRE3的表达水平显著低于WT,腋芽发育相关基因Ls、BL和BRC1b/TCP8和GA合成抑制基因GAI的表达水平显著高于WT。综上,推断SlMAPK6可能通过调控独脚金内酯、GA合成以及控制细胞伸长来调控腋芽的发生,最终影响植株的形态建成。因此SlMAPK6在番茄腋芽生长发育与植株形态建成中发挥重要作用。