【摘 要】
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为了建立转Bar基因大豆的快速、有效检测方法,本研究表达了有生物活性的Bar基因编码蛋白PAT,制备了PAT蛋白的单克隆抗体,进一步建立了免疫胶体金试纸条检测方法.得到以下结果：成功制备了PAT蛋白单克隆抗体10C8和PB3,其抗体亚型均为IgG1,效价均为1∶128 000,且识别不同的抗原表位,可以作为配对抗体用于免疫胶体金试纸条的研制.以10C8作为金标抗体,PB3作为检测抗体,兔抗鼠多抗作
【机 构】
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吉林省农业科学院植物保护研究所,东北作物有害生物综合治理重点实验室,吉林省农业微生物重点实验室,公主岭 136100
【出 处】
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中国植物保护学会2015年学术年会
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为了建立转Bar基因大豆的快速、有效检测方法,本研究表达了有生物活性的Bar基因编码蛋白PAT,制备了PAT蛋白的单克隆抗体,进一步建立了免疫胶体金试纸条检测方法.得到以下结果：成功制备了PAT蛋白单克隆抗体10C8和PB3,其抗体亚型均为IgG1,效价均为1∶128 000,且识别不同的抗原表位,可以作为配对抗体用于免疫胶体金试纸条的研制.以10C8作为金标抗体,PB3作为检测抗体,兔抗鼠多抗作为质控抗体,制备了免疫胶体金试纸条,检测PAT蛋白的灵敏度为1μg/mL.为提高试纸条的灵敏度,降低检测成本,还需要对抗体包被浓度,pH值等条件进一步优化,以实现免疫胶体金试纸条法对转Bar基因大豆的快速检测.
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