目的:了解目前儿科临床分离细菌种类分布及对抗菌药物的耐药性变化。方法:对2003-2008年北京儿童医院住院患儿所有分离菌株进行分析，药敏试验使用纸片扩散法和Phoenix 100微生物分析仪检测，按照临床实验室标准委员会(CLSI)最新的标准进行。使用WHONET5.4软件进行数据的统计分析。结果:革兰阴性菌感染呈上升趋势，革兰阴性菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌为主。革兰阳性菌以肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌为主。肺炎链球菌是儿科呼吸、中枢神经系统和血液感染的重要病原菌，在呼吸道标本中其分离率最高，肺炎链球菌对青霉素非敏感率82.5%，红霉素、克林霉索耐药接近100%(98.2%)。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)79.8%～92.7%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)升至10.6%。肺炎链球菌、葡萄球菌和肠球菌均未发现耐万古霉素的耐药株，但有万古霉素中介的肠球菌检出。革兰阴性菌中，产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌在73.9%～80.0%间；肺炎克雷伯菌在70.5%～81.5%间。未检出对亚胺培南不敏感的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。非发酵菌中，十种抗菌药物对铜绿假单胞菌的抗菌活性由高到低依次为：环丙沙星>头孢他啶>阿米卡星>哌拉西林-三唑巴坦>美罗培南>亚胺培南>哌拉西林>头孢吡肟>氨曲南>庆大霉素。铜绿假单胞菌对碳青霉烯类(亚胺培南、美罗培南)耐药率分别为11.3%和19.2%，鲍曼不动杆菌对两者的耐药率均为3.3%。结论:儿科分离细菌分布和不同菌种对抗菌药物耐药性都有自己的特点。其中，肺炎链球菌对青霉素不敏感率、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率均显著高于成人。儿科MRSA的检出率低，但有逐年增加趋势。儿科分离鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药低于成人。应加强儿科临床分离细菌的监测，了解儿科分离细菌分布及和其对抗菌药物的耐药性变迁，对指导临床合理用药防止耐药菌产生和播散都有重要意义。