【摘 要】
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赛葵黄脉病毒(Malvastrum yellow vein virus,MYVV)是双生病毒科(Gemi-niviridae)菜豆金黄花叶病毒属(Begomovirus)病毒,伴随卫星DNAβ分子(MYVB).该病毒伴随卫星可以侵
【机 构】
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西南大学植物保护学院植物病害生物学重庆市高校级重点实验室,重庆 400716
【出 处】
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中国植物保护学会2014年学术年会
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赛葵黄脉病毒(Malvastrum yellow vein virus,MYVV)是双生病毒科(Gemi-niviridae)菜豆金黄花叶病毒属(Begomovirus)病毒,伴随卫星DNAβ分子(MYVB).该病毒伴随卫星可以侵染赛葵、锦葵、胜红蓟等寄主,引起植株产生黄脉、曲叶、耳突等症状.本研究建立了MYVV的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法,以期为进一步研究各寄主中MYVV的含量奠定基础.利用MYVV及MYVB的侵染性克隆接种本氏烟,发病植株表现为典型的叶片皱缩、黄脉症状,接毒30天后采集叶片,利用CTAB法提取发病植物的总DNA.根据MYVV保守序列,设计特异性引物MY-F：GGGATCCACTTGTAAACGAG/MY-R：GCTGTCGAAGT-TCAGACGA,通过退火温度和引物浓度优化得到最佳反应条件,建立MYVV实时荧光定量PCR体系,并进行灵敏性、重复性检验.实验结果显示：MYVV实时荧光定量PCR体系中,最佳退火温度为61℃,最佳的引物浓度为600 nmol/μl.该体系最低检测限为15个拷贝/μl,其灵敏度是常规PCR的100倍.标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关性系数为1.000,扩增效率达101.2％.组内和组间变异系数均小于0.87％,表明该方法有很好的重复性.
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