【摘 要】
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根据鸡新城疫F糖蛋白的保守基因序列,设计一对引物,称之为正引物.根据正引物设计一对与之相互补的引物,称之为负引物.正引物的5端标记FAM,负引物的3标记淬灭剂DABCYL.反应体
【机 构】
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山东农业大学动物科技学院,泰安,271018
【出 处】
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第二届全国现代免疫诊断技术学术研讨会
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根据鸡新城疫F糖蛋白的保守基因序列,设计一对引物,称之为正引物.根据正引物设计一对与之相互补的引物,称之为负引物.正引物的5端标记FAM,负引物的3标记淬灭剂DABCYL.反应体系中进行引物杂交后,由于正、负引物完全互补,FAM产生的荧光被标记在负引物上的DABCYL淬灭掉.这样,利用杂交后生成的荧光双引物对鸡新城疫及其他四种鸡传染病病毒包括禽流感、传染性喉气管炎、传染性支气管炎和支原体进行了实时荧光PCR检测试验.结果表明,只有以鸡新城疫标准阳性克隆质粒为模板的管中能够检测到荧光信号,其他管中没有信号产生.由于整个检测过程在封闭管状态下进行,污染较少,因此该方法比常规PCR特异性要高的多.总之,该方法特异性强,灵敏度高,重复性好,在鸡新城疫临床诊断和出入境检疫中有着广阔的应用前景.
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