【摘 要】
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我们设计并建立了一种新的生物传感体系,将荧光共轭聚合物的信号放大优势与适配体的灵敏性结合起来,通过荧光共振能量转移机制,为腺苷脱氨酶(ADA)提供了简单、灵敏的检测新方
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我们设计并建立了一种新的生物传感体系,将荧光共轭聚合物的信号放大优势与适配体的灵敏性结合起来,通过荧光共振能量转移机制,为腺苷脱氨酶(ADA)提供了简单、灵敏的检测新方法。在该传感体系中,以阳离子型荧光共轭聚合物PFP为能量给体、以荧光素FAM修饰的含腺苷适配体的寡核苷酸作为探针、荧光嵌入剂溴化乙锭(EB)作为能量受体。在没有ADA时,激发PFP,发生从PFP到Fl的共振能量转移,同时EB没有荧光信号。加入ADA后,ADA酶将腺苷水解成次黄嘌呤核苷,核酸适体发夹结构打开,与互补链结合成DNA双链,使得EB成功嵌入双链DNA中,激发PFP,发生从PFP到荧光素Fl,再从F1到EB的双重荧光共振能量转移,EB荧光信号明显增加。通过检测荧光素到EB的能量共振转移效率就可以检测ADA,该方法检测限可达0.5U/L。此外,该方法可在25分钟内实现ADA的快速检测。因此,该方法简单、快速、灵敏,并为其它酶的检测提供了新思路。
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