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目的:评价血红蛋白对血清标本FQ—PCR检测的影响,分析发生影响的机理。
方法:通过Grubbs离散值分析法和置信区间估计法对扩增效率进行分析及测定值比较,评价采用人为设定不同血红蛋白含量的血清标本进行FQ—PCR法HBV—DNA定量检测的效率。
结果:血红蛋白含量为0.6、3.0、5.0、10.0、20.OG/L的样本扩增曲线分析显示,扩增效率与同批次质控样本、标准参考品扩增效率EO.05-0.1数值组无显著差异;不同HBV—DNA浓度水平的含血红蛋白组的扩增效率与同批次正常血清样本无显著差异;5组不同血红蛋白含量的高浓度(>1.00E+7拷贝/ml)样本浓度测定值分别为无血红蛋白样本的83%、51%、22%、15%、8%;5组不同血红蛋白含量的低浓度(3.43E+3拷贝/ml)样本浓度测定值则未见显著差异。
结论:血红蛋白对FQ—PCR检测的干扰最主要可能不是来自于抑制扩增反应,而产生于模板制备过程中导致的损失。