【摘 要】
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本研究的目的是探讨低剂量雌二醇(E2)和双氢睾酮酮DHT)暴露对黑斑蛙性腺分化发育的影响。实验室自养的成熟黑斑蛙注射激素后置诱导繁殖箱中诱导产卵,5天后将26阶段的蝌蚪暴露
【机 构】
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中国科学院生态环境研究中心 北京 100085
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本研究的目的是探讨低剂量雌二醇(E2)和双氢睾酮酮DHT)暴露对黑斑蛙性腺分化发育的影响。实验室自养的成熟黑斑蛙注射激素后置诱导繁殖箱中诱导产卵,5天后将26阶段的蝌蚪暴露于系列浓度(10,100,1000ng/L)的DHT和E2中。同时设溶剂对照。每个处理组3个平行缸,每个缸25只蝌蚪。暴露过程中每周换水三次,换水后加药。当蝌蚪完成变态成小蛙时,取脑和性腺,一部分提取RNA,做QRT-PCR实验,进行性相关基因表达分析,另一部分样品取性腺组织固定,显微镜下观察初步鉴别雌雄,石蜡切片HE染色进一步确定雌雄并分析组织学结构,在此基础上统计性别比。
结果发现,对照组的性腺基本正常,雌雄比接近1:1;DHT暴露组出现一定比例的异常性腺,包括无性腺、一侧性腺缺失、未分化性腺、两性等,异常比例随剂量增加而增加,正常雄性比例与对照相比略有增加,但无统计学意义;E2暴露组也有少量异常性腺出现。组织学结构研究发现,DHT抑制卵巢的发育,甚至导致两性发生;E2影响精巢发育,使精巢出现体细胞增加、出现中央空腔等卵巢的某些特征,一些精巢的生殖细胞出现坏死。QRT-PCR对性相关基因的研究发现,DHT和E2对黑斑蛙雄激素受体AR、雌激素受体ER以及与胆固醇激素合成和转化相关的一些基因表达均有影响。
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