香灰菌是银耳的伴生菌,为银耳子实体的生长和发育提供营养物质。本研究以银耳主栽品种中的香灰菌TJAS01作为出发菌株,为研究其降解基质中木质素、纤维素相关基因的功能做以下三方面工作。1)采用Pacbio测序技术、长片段PCR等手段对TJAS01进行全基因组测序和拼接,获得其完整的基因组序列:香灰菌基因组为38.90 Mb,包含10条染色体和一个环状的线粒体DNA(没有gap,不存在多余的reads)。2)利用全基因组数据,预测出香灰菌中CAZyme相关基因有437个;通过转录组测序,获得这些CAZyme相关基因中有36个在木屑培养基(20天和32天取样)和马铃薯葡萄糖培养基(固体和液体培养基)中均未表达(拟假基因),114个木屑培养基和马铃薯葡萄糖培养基中表达差异显著,其中25个基因在木屑培养基中的表达量是马铃薯葡萄糖中的20倍以上(FPKM值)。3)采用PEG介导至原生质体的方法,将荧光蛋白基因导入香灰菌TJAS01中,并敲除了香灰菌基因组中的KU70和KU80基因,从而成功构建了香灰菌的外源基因转化和基因敲除体系,为其木质素和纤维素降解基因研究提供技术支撑。